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五种灭菌器对牙科手机灭菌效果的研究

[导读]5种灭菌器生物监测均合格, 5种压力蒸 汽灭菌器杀菌效果都可达 100%,其中 2种灭菌器灭菌的所有牙科手机 HBs Ag抗原性检测均为阴性, 其他 3种灭菌 器灭菌的牙科手机各有 1支 HBs Ag抗原性检测为阳性。

牙科手机是口腔科临床最常用的器械之一,它 在治疗过程中密切接触患者唾液、血液等,因此污染 程度较高,卫生部《消毒技术规范》中明确规定临床 使用后的牙科手机必须经灭菌处理[ 1, 2] 。由于牙科 手机存在回吸问题且结构复杂,部件精密,因此临床 可采纳的灭菌方法有限,目前临床使用的灭菌方法 不统一,灭菌效果也不一致。 我院 2001年曾对北京市各级医院牙科手机消 毒状况进行调查, 30家医院 340例样本的调查结果 显示 临 床 常 用 的 消 毒 或 灭 菌 方 法 为 擦 拭 法 ( 62. 9%) ,浸泡法( 10%) 和压力蒸汽法( 27. 1%)。 擦拭法检菌阴性件数所占比例为 26. 2%,浸泡法检 菌阴性件数所占比例为 55. 9%,压力蒸汽法灭菌合 格率为 80. 4%。虽然,目前国际认可的牙科手机灭 菌方法是压力蒸汽灭菌法,在调查中,压力蒸汽灭菌 法的灭菌合格率仅为 80. 4%,我国目前应用的压力蒸汽灭菌器性能是否可靠,是目前亟待了解的问题, 因此选取 5个品牌的压力蒸汽灭菌器,检测其灭菌 效果,该 5种灭菌器均经卫生部检测合格,代表预真 空和下排气两大类灭菌器。
材料与方法

检测方法

1.用 3M1262生物检测试验管( 嗜热脂肪杆菌 芽胞) 对 5种灭菌器空载及满载灭菌性能各检测 3次。用 At t e s t 生物培养箱, 56℃培养 48 h ,观察显色 结果,紫色为灭菌成功,黄色为灭菌失败。 2. 5种压力蒸汽灭菌器对 HBs Ag 抗原性破坏实 验。 ①HBs Ag 悬液配制: 用洗脱液( 0. 03 mo l /LPBS 加 10%小牛血清) 将 1 mg /mLHBs Ag稀释至 100 μg /mL ,依据《消毒技术规范》[ 2] 。 ②用 HBs Ag悬液浸泡污染牙科手机机头 5 c m , 共浸泡污染 152支牙科手机,沥干, 37℃恒温干燥 30 mi n ,制成实验用污染手机。 ③将 150支牙科手机分为 5组,每组 30支分别 由 5种压力蒸汽灭菌器进行灭菌处理。阳性对照组 为 2支不经灭菌处理的污染牙科手机。 ④无菌操作取出灭菌处理后的牙科手机和阳性 对照组污染 HBs Ag 的牙科手机,每支手机分别置于 24 mL / 管的洗脱液中,于旋涡混合器上震荡 40 s ,取 出牙科手机,用 HBs AgELI S A检测试剂盒 ( 四环生 物工程有限公司产品) 对洗脱液进行 HBs Ag抗原性 检测( 试剂盒灵敏度为 2 n g ) ,同批实验用洗脱液作 为阴性对照。 3. 5种压力蒸汽灭菌器对临床污染牙科手机灭 菌效果的检测。 ①临床随机抽取 152支牙科手机,随机分为 5 组,每组 30支分别由 5种压力蒸汽灭菌器进行灭菌 处理。阳性对照组为 2支不经灭菌处理的污染牙科 手机。 ②无菌操作取出灭菌处理后的牙科手机和阳性 对照组临床污染牙科手机,每支手机分别置于 24 mL / 管的洗脱液中,于旋涡混合器上震荡 40 s ,取出 牙科手机,将洗脱液分别接种于 2支硫乙醇酸盐培 养液试管和 1支霉菌培养液试管。将其中 1支硫乙 醇酸盐培养液置 37℃恒温有氧条件下,连续培养 5 d; 另 1支硫乙醇酸盐培养液置 37℃恒温厌氧条件 下,连续培养 5 d; 霉菌培养液置 22℃恒温有氧条件 下,连续培养 7 d 。每天观察培养结果并记录。无菌 硫乙醇酸盐培养液和霉菌培养液作为阴性对照。
结 果

3M1262生物检测试验管对 5种灭菌器空载和 满载的灭菌效果进行检测,结果显示均为紫色,杀灭 率 100%。 5种灭菌器对 150支临床污染牙科手机进行灭 菌 ,无菌检测均为阴性, 5种灭菌器的杀灭率均为100%。阴性对照无菌生长,阳性对照有菌生长。 以实验组 OD值(S) 与阴性对照组 OD值(N) 比值, S /N值小于 2. 1为 HBs Ag 抗原性破坏标准, 2 号和 4号灭菌器灭菌处理后的牙科手机 HBs Ag抗 原性检测均为阴性;1、3、 5号灭 菌器均有 1 例 HBs Ag抗原性检测阳性, S /N值分别为 2. 18、2. 2和 2. 24。阴性对照组洗脱液 S /N值为 1. 08。
讨 论 对 5种压力蒸汽灭菌器进行检测,结果显示这 5种灭菌器对嗜热脂肪杆菌芽孢的杀灭率均达 100%,对临床自然污染牙科手机的灭菌合格率达 100%。另外,实验表明 2号和 4号灭菌器对 HBs Ag 抗原性破坏合格率达 100%,而 1、3、5号灭菌器以 S /N值 2. 1为届值,均有 1例 HBs Ag 抗原性检测阳 性, S /N值分别为 2. 18、2. 2和 2. 24。由于乙肝表面 抗原血清标志物阳性不能证明有乙肝病毒存活,因 此是否有存活的乙肝病毒尚需进一步检查。由于嗜 热脂肪杆菌芽胞是检验压力蒸汽灭菌效果的代表菌 株,因此此项实验可初步证明这 5种灭菌器灭菌性 能可靠,均可用于牙科手机灭菌。 压力蒸汽灭菌是国际认可的牙科手机灭菌方 法,欧美一些发达国家的牙医已开始比较严格的遵 守交叉感染控制规范的要求,普遍使用压力蒸汽灭 菌器对牙科手机进行灭菌处理。 1991年,英格兰地 区的牙医采用压力蒸汽法灭菌牙科手机的比例已达 到 91%。从 1994年到 1995年,美国和加拿大安大 略湖地区的牙医采用压力蒸汽法灭菌牙科手机的比 例从 83%提升至 95%。 1995年分层随机抽取 6444 名加拿大牙医,问卷调查结果表明,采用压力蒸汽法 灭菌牙科手机的比例已达 94% [ 3, 4] 。而 2001年对 北京市 30家医院的调查结果显示,采用压力蒸汽灭 菌的比例仅为 27. 1%,此方法未能在我国得到普遍 推广存在以下几个因素: 初期需要一定设备投入,包括牙科手机和灭菌器; 医务人员认为会造成牙科手 机性能损害; 消毒灭菌知识匮乏,意识较差等。 关于牙科手机经压力蒸汽灭菌后,机械性能损 害问题,国内外已有学者做过研究,研究结果表明如 果牙科手机经过适当的保养和维护, 至少可耐受 500次压力蒸汽灭菌处理[ 5 ] 。 为确保灭菌效果和牙科手机使用寿命在灭菌牙 科手机时应严格遵守灭菌保养操作流程[ 6 ] :①冲洗 管路至少 30 s ,可排除大量管路内的回吸污染物; ② 清洗,可减少牙科手机表面甚至内部的残垢和污染 物的载量; ③上清洗润滑油,可冲洗管路内部,排除 管路内的残垢,并且起到机械润滑作用,保护零部 件; ④空转牙科手机排除多余废油,以免废油加热后 氧化成固体物质造成部件粘连;⑤用无菌包装袋密 封灭菌,灭菌后可做到无菌存放,避免造成再次污 染; ⑥压力蒸汽灭菌器灭菌; ⑦洁净存放[710] 。 在北京市 30家医院牙科手机消毒现状调查中, 压力蒸汽法灭菌合格率为 80. 4%,可能与以下因素 有关: 灭菌器可能未经卫生部门检测合格; 操作人员 未按灭菌器操作要求灭菌牙科手机; 灭菌前牙科手 机未经完善清洗; 灭菌后的牙科手机未经无菌存放, 暴露于空气中造成 2次污染等。 为确保牙科手机灭菌效果和使用寿命,口腔医 疗机构应选择卫生部检测合格的压力蒸汽灭菌器作 为牙科手机的灭菌设备,做到 1人一用一灭菌,并且在灭菌牙科手机时应严格遵守灭菌保养操作流程。

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