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台式压力蒸汽灭菌器的应用及其灭菌效果观察

[导读]观察台式压力蒸汽灭菌器在特殊物品灭菌中的应用及其灭菌效果。方法 通过化学指示剂监测法,观察了小型台式压力蒸汽灭菌器对细胞培养用品和配液的灭菌效果。结果 用内源蒸汽台式压力蒸汽灭菌器, 在121度条件下对细胞培养配液灭菌25 m in, 对细胞培养配液达到灭菌通过; 在132度 条件下灭菌12 m in, 对手术器械、玻璃培养器皿、胶塞等物品包达到灭菌通过。

小型台式压力蒸汽灭菌器是近年来逐渐在医院推广使用的应急快速灭菌设备, 适用于各种耐高温耐高压手术器械。本研究旨在探讨台式压力蒸汽灭菌器用于眼科实验室细胞培养器械物品和细胞培养液及其他各种用液的灭菌可能性。试验所用灭菌器为一种台式压力蒸汽灭菌器, 为电热内源蒸汽方式,灭菌程序可随机设定。灭菌器的控制由微电脑控制系统完成, 其升温快, 控制精确稳定, 灭菌器操作方便, 灭菌效果可靠。选择本医院眼科实验室细胞培养用品为对象, 先后进行了1 200次灭菌处理, 同时进行了灭菌效果监测和灭菌物品使用验证, 效果满意。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验仪器设备有台式压力蒸汽灭菌器, 由连云港千樱医疗设备有限公司生产; 恒温干燥箱, 为广州市雄发仪器有限公司产品; 超净工作台, 为广州市苏泰空调净化设备有限公司和番禺雷蒙特科学实验设备厂提供。

特殊器材包, 内含手术器械、玻璃培养器皿、胶塞等; 细胞培养配液, 本实验室自行配制。

1.2 试验方法

1.2.1 试验准备 1 细胞配液清洗: 所需玻璃器皿经清洗后, 用硫酸- 重铬酸钾洗液浸泡过夜, 用清水冲洗干净, 再用重蒸水冲洗数十次, 烤干后用纱布牛皮纸棉线包扎瓶口, 然后经压力蒸汽灭菌。o 过滤装置准备: 把用于配液过滤的过滤器装好滤膜, 用2层布包好, 经压力蒸汽灭菌。» 胶塞准备: 将待用胶塞置于清洁剂溶液内煮沸10m in, 清水洗净, 再置于重蒸水中煮沸10 m in, 重复煮沸2次, 烤干, 待包装。¼ 特殊器械包: 将准备好的手术器械、培养器皿、胶塞等放入用方盒, 用2层布包好, 经压力蒸汽灭菌。½ 各种液体准备: 将重蒸水和D - H anks液分别装入洁净玻璃瓶内, 加盖释压胶塞, 用121e下排气式压力蒸汽灭菌。¾ 监测器材: 所有待灭菌的物品包外贴封3M压力蒸汽灭菌指示胶带。

1.2.2 灭菌前准备 进行常规工艺检查, 包括压力蒸汽灭菌器的压力表、温度表、报警器等, 加水并检查水位线, 检查等待灭菌物品包装的完整性, 放置指示物等。

1.2.3 灭菌步骤 按规范要求装载好待灭菌物品,关闭灭菌器锁扣, 接通电源; 设定液体物品用121e灭菌25 m in; 特殊器材包用132度灭菌12m in; 启动灭菌程序。灭菌结束后, 将灭菌后的物品包移入60e 电热恒温干燥箱干烤1~ 2 h后, 储存于细胞培养房的无菌柜备用。

1.2.4 结果观察 首先检查灭菌物品包化学指示器材变色是否合格; 定期(有效期1周)取出储存物品进行无菌检验。使用台式压力蒸汽灭菌器灭菌处理的物品, 经细胞培养实际应用, 观察细胞生长情况, 以判定灭菌物品对细胞生长的影响。

2 结果

2.1 监测结果

结果表明, 小型台式压力蒸汽灭菌器对眼科实验室各种特殊器械包和各种液体包装灭菌处理后,所有化学指示剂的指示色块变色均符合标准色, 化学监测全部通过。各种灭菌后的特殊器械包和配液在有效储存期内, 经无菌检验全部无菌生长, 保持灭菌合格(表1)。

2.2 实际应用结果

经使用该灭菌器灭菌的器材和配液进行各种细胞培养结果证明, 所培养的视网膜色素上皮细胞、人脐静脉内皮细胞、人视网膜微血管内皮细胞等都生长良好(见扉页彩图1a~ d)。

3 讨论

小型台式压力蒸汽灭菌器是近年来迅速发展起来的一类医用灭菌设备, 通常称之为快速压力蒸汽灭菌器, 主要用于医疗机构特殊器械和应急器械快速灭菌。由于此类灭菌装置可安装在使用器材的现场或附近, 因而其实用性比较广泛。此类灭菌器有下排气式, 也有预真空式, 灭菌物品可以包装后即灭即用。本研究旨在观察此类灭菌器对实验室内特殊器材和各种培养液的灭菌效果和实际应用的影响,以便为细胞培养工作者提供便利和提高工作效率。我们在使用该灭菌器过程中, 把灭菌前的准备工作做得很充分, 更加重视各种工艺检查。实践证明, 小型灭菌器内待灭菌物品不能装满, 应留有空间, 以利于冷空气排除和蒸汽穿透。从灭菌开始到结束每一步都要严格按要求进行操作, 保证消毒灭菌效果; 干燥箱烤干灭菌后物品是利用热空气消毒灭菌, 烤箱通电加热后的空气在一定空间不断对流, 产生均一效应的热空气穿透物体, 在灭菌消毒后再把物品烤干达到热空气消毒后, 取出备用。

在评价灭菌效果过程中, 主要采用化学监测法。 而没有采用生物指示剂, 观察生物效果主要采用对灭菌物品的无菌检验加以证明。灭菌结果证明, 用该灭菌器灭菌处理后的物品在有效期内都保持无菌状态132, 同时观察到各种灭菌物品对多种细胞生长均无不良影响。压力蒸汽灭菌效果监测包括程序监测、化学指示监测和生物监测14- 62, 但最直接的监测是无菌检验, 结果可靠。


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